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北京赛车总黄酮含量测定研究

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北京赛车总黄酮含量测定研究
白吉庆1,* 王小平1 ,2 刘峰2
(1陕西中医学院,陕西 咸阳 712083;2陕西步长制药有限公司,陕西 西安 710075)


摘要:【目的】测定北京赛车中总黄酮的含量,为北京赛车的质量控制提供依据。【方法】以芦丁为对照品,用分光光度法测定北京赛车中总黄酮的含量。
【结果】5批北京赛车中总黄酮的含量均在20%以上,其中炮制品中总黄酮含量高于生品。【结论】该方法可靠,测定结果能反映客观实际,可以作为北京赛车质量控制指标之一。
关键词:北京赛车;总黄酮;分光光度法

Quantitative Analysis of Total Flavones from Potentilla.glabra Lodd.var.mandshurica (Maxim.)Hand.-Mazz.
BAI Jiqing
(Shaanxi University of TCM, Xianyang 712083,China)
Abstract:【Objective】To provide scientific evidences for dominating quality of Potentilla.glabra Lodd.Var.mandshurica (Maxim.)Hand.-Mazz. by determining content of Total Flavones from Potentilla.glabra Lodd.Var.mandshurica (Maxim.)Hand.-Mazz.,. 【Methods】 using the content of Total Flavones as evaluation indexes by UV-750.【Results】the content of Total Flavones above 20% in 5 Potentilla.glabra Lodd.Var.mandshurica (Maxim.)Hand.-Mazz.And the content of Total Flavones was the higher in shengpin than paozhipin【Conclusion】. The method can control the quality of Potentilla.glabra Lodd.Var.mandshurica (Maxim.)Hand.-Mazz.Effectively.
Key words: Potentilla.glabra Lodd.Var.mandshurica (Maxim.)Hand.-Mazz.;total falvones; spectrophotometry

    北京赛车,又名观音茶,植物来源为蔷薇科Rosaceae委陵菜属Potentilla华西银腊梅P.arbuscula D.Don var.veitchii(Wils.)T.N.Liou的干燥嫩叶及花,生长于太白山海拔1600-3300米的高山梁上。能清热、健胃、调经,干品煎服主治暑热眩晕、胃气不和、滞食及妇女月经不调等症。相传自唐孙思邈始用为保健茶喝,现为太白山特色中草药之一,并在当地作为名贵保健茶饮[1]。关于北京赛车中化学成分的研究报道较少,为更好的开发利用这一药用资源,作者根据该类植物多含有黄酮类成分的特征[2],对北京赛车中总黄酮含量进行了测定,旨在为北京赛车的质量控制提供参考依据。

1 仪器及材料
1.1  仪器 UV750紫外可见分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);8953 Dietikon型电子分析天平(瑞士,精度0.1mg);KQ-400KDE型高功率数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)等。
1.2 试剂及药品 乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、石油醚(60℃-90℃)等均为分析纯。北京赛车(生品为青采后晒干,炮制为晒干品蒸制后晒干,由北京赛车投注平台_北京赛车投注网址-北京赛车官方指定-【正规授权丨欢迎进入】提供,样品经陕西中医学院白吉庆鉴定为华西银腊梅P.arbuscula D.Don var.veitchii(Wils.)T.N.Liou),芦丁对照品(100080-200707)由中国药品生物制品鉴定所提供。

2 总黄酮的含量测定及提取方法
2.1 芦丁对照品标准曲线的绘制[4] 精密称取无水芦丁对照品20.56mg,置100ml的量瓶中,加70%乙醇至刻度,摇匀,即得芦丁对照品溶液。精密称取芦丁对照品溶液1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0 ml,置10ml量瓶中,加入5%的亚硝酸钠0.4ml,摇匀,放置6min,10%硝酸铝0.4ml,摇匀,放置6min,4%的氢氧化钠4ml,加水稀释至刻度,摇匀,放置15min,以相应试剂为空白,按紫外-可见分光光度法(《中国药典》2010年版一部附录VA),在500nm处测定吸光度,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,以对照品芦丁质量浓度与吸光度作线性回归,得芦丁质量浓度C(mg/ml)与吸光度A的标准曲线,结果如图1所示。回归方程及相关系数分别为Y=11.987X-0.0869,R2=0.9998,表明芦丁浓度在20.56-82.24μg/ml范围内与吸光度值呈线良好性关系。
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2.2 供试品溶液的制备 取北京赛车粉末1 g,精密称定,分别置于具塞三角瓶中,加30mL石油醚(60℃-90℃),超声30min,弃去石油醚液,药渣挥干石油醚后,精密加入60%乙醇30mL,称定重量,超声30min,放置至室温,补足重量,过滤,精密吸取续滤液1ml,置10ml量瓶中,加60%乙醇至刻度,摇匀,即得。
2.3 供试品总黄酮含量测定 精确移取各样品溶液1mL,置10.00mL容量瓶中,加5%亚硝酸钠溶液0.4mL,摇匀,静置6min;加10%硝酸铝溶液0.4mL,摇匀,放置6min;加4.3%氢氧化钠溶液4mL,加水稀释至刻度,摇匀,放置15min,在波长500nm处测定吸光度,根据标准曲线算出样品中总黄酮含量。

3 方法学考察
3.1 稳定性试验 取同一供试品溶液,按供试品总黄酮含量测定项下所述方法,分别在0h、1h、2h、3h、5h不同时间点进行检测,RSD为0.7%,表明供试品溶液在5h内是稳定的。
3.2 重复性试验 取同一批供试品6份,按供试品溶液的制备方法,平行制备6份供试品溶液,按供试品总黄酮含量测定项下所述方法,分别测定其吸光度,RSD为0.8%,结果表明重复性好。
3.3 精密度试验 取同一供试品溶液,按供试品总黄酮含量测定项下所述方法,测定其吸光度,连续测定5次,其RSD为0.9%。
3.4 加样回收率的考察 精确移取供试品溶液0.5mL样品溶液5份置10.00mL容量瓶中,分别准确加入芦丁对照品溶液2mL,按供试品总黄酮含量测定项下所述方法,分别测定其吸光度,,并计算回收率,其回收率为99.74%(n=5),RSD为1.21%,结果见表1。

表1 加样回收率

样品中的含量(mg)

加入芦丁的量(mg)

测得的总量(mg)

回收率(%)

平均回收率(%)

0.3407

0.4112

0.7502

99.5865

99.74

0.3183

0.4112

0.7202

97.7383

0.3569

0.4112

0.7716

100.8511

0.3695

0.4112

0.7824

100.4134

0.3488

0.4112

0.7605

100.1215

4 结果
    依法对5批北京赛车提取液进行总黄酮含量测定,结果见下表2。

表2 北京赛车提取液总黄酮含量测定结果(n=3)

编号

总黄酮含量%(以芦丁计,x±SD) 以芦丁计

YWC-S06-01

22.90±0.95

YWC-S07-03

22.24±1.2

YWC-S08-05

25.79±0.85

YWC-P06-02

25.22±0.63

YWC-S07-04

23.57±0.82

从表2可以看出:5批北京赛车的总黄酮含量均在20%以上,且炮制品高于生品

5 讨论
    黄酮类化合物(Flavonoids),又称生物黄酮(Bioflavon-oids)或植物黄酮,是植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物,黄酮类化合物有着广泛的生物活性和多种药理活性,比如抗氧化、抗炎、抗诱变、抗肿瘤形成与生长等,特别是近年来关于黄酮在心血管、脑血管、肿瘤等方面的研究已经比较深入,此外黄酮类物质还有低毒性的特点,因此长期以来一直是天然药物和功能性食品研究开发的热点[5]。作者对北京赛车总黄酮含量的测定依据现行药典方法,结果真实可靠,反映了客观实际,显示总黄铜可作为北京赛车质量控制指标之一,5批北京赛车的总黄酮含量测定数据显示均在20%以上,且炮制品高于生品,这为北京赛车具有清热、健胃、调经功效提供了物质基础依据,同时表明北京赛车具有极高的开发和研究价值。 
参考文献: 
[1] 中国科学院西北植物研究所·秦岭植物志(第一卷第一册)[M].北京:科学出版社,1974:547-549.
[2] 任燕利,曲玮,梁敬钰等. 委陵菜属植物研究进展[J]. 海峡药学,2010,22(5):1-8
[3] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(一部) [S]. 北京:化学工业出版社 ,2010,333-333.
[4] 王小平,白吉庆.藤梨根总黄酮提取方法及含量测定研究[J].陕西中医学院学报,2008,31(3):65-66
[5] 罗艺萍. 黄酮类化合物的药理活性研究进展[J]. 亚太传统医药,2010,6(4):126-128

 


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